操作步驟： 1、首先于潔凈載玻片上，滴1-2滴乳酸酚棉藍(lán)染色液。 2、用接種鉤從霉菌菌落的邊緣外取少量帶有孢子的菌絲置于染色液中，再細(xì)心地將菌絲挑散開。 3、小心地蓋上蓋玻片（加熱或不加熱），盡量避免產(chǎn)生氣泡。 4、置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡。 黑曲霉的菌絲體和產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)等皆可被染成亮藍(lán)色；背景為淡的藍(lán)色。

實(shí)驗(yàn)原理： 本實(shí)驗(yàn)主要用于蠟樣芽胞桿菌的鑒定。 蠟樣芽孢桿菌在含0.001％溶菌酶的培養(yǎng)基中能生長，使生化管變渾濁。 操作步驟： 1. 取出溶菌酶生化管，置于安瓿瓶試管架中，做好標(biāo)記，包括菌株名稱、菌株編號，在易折點(diǎn)處（即瓶頸上方藍(lán)點(diǎn)）掰開安瓿瓶，備用。 2. 用移液槍吸取50ul-100ul的已稀釋好的蠟樣芽孢桿菌懸液（接種量＞5000cfu）加到生化管中，混合均勻，相同方法接種枯草芽孢桿菌，并設(shè)置一支空白對照，放置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h-48h。 3. 觀察試驗(yàn)結(jié)果。 試驗(yàn)結(jié)果判斷： 培養(yǎng)24-48h結(jié)束后，取出生化管，觀察試驗(yàn)結(jié)果，接種蠟樣芽孢桿菌的生化管變渾濁，為陽性結(jié)果；接種枯草芽孢桿菌的生化管為澄清，與空白對照一致，為陰性結(jié)果。 注意事項(xiàng)： 此試驗(yàn)需用新鮮的菌液，接種量一定要＞5000cfu；要是接種量太少會無法清楚判斷試驗(yàn)結(jié)果。

操作步驟： 1. 將配制好的培養(yǎng)基放入恒溫水浴鍋中保溫（水浴鍋的溫度可根據(jù)培養(yǎng)基相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行設(shè)定）。 2.根據(jù)情況在無菌平皿上注明培養(yǎng)基名稱、時間、菌號。 3.吸取1mL制備好質(zhì)控菌株菌懸液加至無菌空平皿中央處，從水浴鍋中取出培養(yǎng)基，在酒精燈上灼燒瓶口，傾注于平皿中央有菌液的地方，倒入約15mL培養(yǎng)基。若培養(yǎng)時間超過48h或培養(yǎng)溫度高于40℃，則可適當(dāng)傾注更多的培養(yǎng)基。 4.順時針、逆時針各搖至少5次，盡量多搖幾次，注意力度不要太大以防含菌培養(yǎng)基外濺，也不能太輕以防搖不開從而出現(xiàn)成片菌落，不宜計數(shù)。 5.放置水平臺面待培養(yǎng)基凝固，凝固后即可開始覆蓋，大約使用5mL培養(yǎng)基即可，覆蓋時注意平皿邊緣也要覆蓋住。 6.待培養(yǎng)基完全凝固后，按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。 結(jié)果觀察： 傾注接種的平板菌落特征與涂布接種的是有明顯區(qū)別的，涂布接種的菌落是在培養(yǎng)基表面生長，為圓形菌落，有明顯的凸起；而傾注接種的菌落是在培養(yǎng)基內(nèi)部生長，形狀多為不規(guī)則。因此，在檢驗(yàn)樣品時，要按照相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的要求進(jìn)行操作。

實(shí)驗(yàn)步驟： 1.取一支葡萄糖酸鹽生化管掰開安瓿瓶，備用。 2.用移液槍吸取100微升菌懸液，接種到生化管中。本次試驗(yàn)以大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌為例進(jìn)行試驗(yàn)。 3.接種完畢后，放置于36℃?1℃培養(yǎng)24h?2h。 4.培養(yǎng)結(jié)束后取出生化管觀察，發(fā)現(xiàn)生化管變渾濁，說明細(xì)菌生長良好。 5.然后取一瓶班氏試劑，按照1:1的比例加入生化管中。 6.將生化管置于沸水浴中加熱1-10分鐘。 結(jié)果判定： 大腸埃希氏菌：陰性，淺藍(lán)色 銅綠假單胞菌：陽性，磚紅色 實(shí)驗(yàn)原理： 銅綠假單孢菌可將葡萄糖酸鉀分解成還原性的葡萄糖，然后與班氏試劑產(chǎn)生磚紅色沉淀。

近期收到客戶反饋，反應(yīng)塑料瓶裝液體培養(yǎng)基鋁塑蓋不易打開，開蓋時容易出現(xiàn)鋁塑拉環(huán)斷裂的情況，本視頻就為大家講解一下正確的開啟方法。 正確的開啟方法： 1、向上用力掀開塑料瓶蓋。 2、抬起鋁塑環(huán)，沿著鋁塑蓋上的刻痕，水平方向用力拉動拉環(huán)。 3、之后向下按壓著拉環(huán)，同時向一側(cè)發(fā)力拉動，即可輕松打開鋁塑蓋。 錯誤示范： 拉開鋁塑環(huán)后，沒有向下按壓直接向一側(cè)用力拉動，就會出現(xiàn)不易拉開和拉環(huán)斷裂的情況。

配制操作： 稱取皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)干粉加熱溶解于純化水中，在試管中放入數(shù)顆皰肉牛肉?；蛩槿庠?，高度約為1-2cm，可同時加入0.1-0.2g還原性鐵粉，（牛肉粒中含有較多還原性的谷胱甘肽和巰基基團(tuán)，與還原性鐵粉一起維持培養(yǎng)基內(nèi)的厭氧環(huán)境，有利于厭氧菌的生長）將皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)分裝于試管中，最后再加入0.3-0.4cm厚度的液體石蠟覆蓋液面，（液體石蠟可以隔絕空氣，保持培養(yǎng)基內(nèi)部封閉的厭氧環(huán)境）之后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后使用。皰肉培養(yǎng)基可用于多種厭氧菌的培養(yǎng)，此培養(yǎng)基更適合用于梭菌屬，如產(chǎn)氣莢膜梭菌、生孢梭菌、肉毒梭菌等的活化、增菌培養(yǎng)和保存。

實(shí)驗(yàn)原理： 此試驗(yàn)通常用于變形桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、致瀉大腸埃希氏菌的生化鑒定。 有些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解、產(chǎn)生2個分子的氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，酚紅呈粉紅色。 操作步驟： 1. 首先，需要準(zhǔn)備的物品有：新鮮培養(yǎng)的待測菌株、尿素酶生化管、接種針及其它常備試驗(yàn)用品。 2. 取出尿素酶生化管，做好標(biāo)記，在易折點(diǎn)處（即瓶頸上方藍(lán)點(diǎn)）掰開安瓿瓶，備用。 3. 用接種針挑取普通變形桿菌菌體在斜面上呈“之”字形劃線并穿刺底層培養(yǎng)基，接種完畢后，用封口膜將管口進(jìn)行密封，相同的方法接種其他菌株，并設(shè)置一支空白對照，放置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。 4. 培養(yǎng)結(jié)束后，取出生化管，觀察試驗(yàn)結(jié)果。 結(jié)果判定： 接種普通變形桿菌的生化管中菌株生長良好，培養(yǎng)基變成玫紅色，為尿素酶陽性；接種大腸埃希氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、福氏志賀氏菌和霍亂弧菌的生化管中菌株均生長良好，培養(yǎng)基為黃色，為尿素酶陰性。

操作步驟： 1.取一支鳥氨酸脫羧酶肉湯生化管，做好標(biāo)記，在易折點(diǎn)處（即瓶頸上方藍(lán)點(diǎn)）掰開安瓿瓶，備用。 2.用移液槍吸取100ul的已稀釋好的福氏志賀氏菌懸液（接種量＞5000cfu）加入到生化管中，混合均勻，然后需加100ul的無菌液體石蠟覆蓋培養(yǎng)基液面。無菌液體石蠟用來隔絕氧氣，不加會影響試驗(yàn)結(jié)果的判定。 3. 用相同方法接種鼠傷寒沙門氏菌，并同時各接種一支對照管（氨基酸脫羧酶對照管），之后放置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。 結(jié)果觀察： 發(fā)現(xiàn)接種的福氏志賀氏菌的生化管變?yōu)辄S色并且渾濁，結(jié)果為陰性。 而接種鼠傷寒沙門氏菌的生化管為紫色且渾濁，結(jié)果為陽性 。 實(shí)驗(yàn)原理： 這是因?yàn)榧?xì)菌首先分解培養(yǎng)基中的葡萄糖產(chǎn)酸使培養(yǎng)基變成黃色， 而具有鳥氨酸脫羧酶的細(xì)菌，可分解鳥氨酸使其脫羧生成腐胺和二氧化碳，使培養(yǎng)基變堿，因此培養(yǎng)基又變回紫色。 特別注意： 本實(shí)驗(yàn)必須同時接種對照管，若對照管和鳥氨酸脫羧酶肉湯生化管均為紫色，說明試驗(yàn)菌為氧化型細(xì)菌或產(chǎn)堿型細(xì)菌，則不能判斷該反應(yīng)的陰陽性。